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微生物ELISA试剂盒

简要描述:微生物ELISA试剂盒-微囊藻毒素LR(MC-LR)elisa检测试剂盒介绍:
应用:定性/定量/酶活检测
样本:血清、血浆、唾液、尿液、组织、细胞上清、裂解液等
适应物种:人、小鼠、大鼠、植物、鱼、虾、蟹、牛、羊、狗、猫、微生物、细胞、土壤等动植物

  • 产品型号:96T/48T
  • 厂商性质:生产厂家
  • 更新时间:2023-05-08
  • 访  问  量:473
产品详情

本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。

微生物ELISA试剂盒-微囊藻毒素LR(MC-LR)elisa检测试剂盒使用说明书:

检测原理:

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被微囊藻毒素LR(MC-LR)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻-底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的微囊藻毒素LR(MC-LR)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法:

1.  样本不能含叠氮钠(NaN3),因为叠氮钠(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。

2.  标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行。

3.  植物萃取液或其它相关样本:请1000xg离心20分钟,取上清即可检测。

4.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

自备物品:

1. 酶标仪(450nm)

1. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

2. 37℃恒温箱

操作注意事项:

1.  试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶全/部溶解后再使用。

2.  实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。

3.  浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。

4.  严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

5.  所有液体组分使用前充分摇匀。

微囊藻毒素LR(MC-LR)elisa检测试剂盒试剂盒组成:

名称

96孔配置

48孔配置

备注

微孔酶标板

12孔×8条

12孔×4条

标准品

0.3mL*6管

0.3mL*6管

样本稀/释/液

6mL

3mL

检测抗体-HRP

10mL

5mL

20×洗涤缓冲液

25mL

15mL

按说明书进行稀释

底物A

6mL

3mL

底物B

6mL

3mL

终止液

6mL

3mL

封板膜

2张

2张

说明书

1份

1份

自封袋

1个

1个

注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、4、8、16、24、48ng/L。

微生物ELISA试剂盒试剂的准备:

20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。

洗板方法:

1.  手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。

2.  自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。

操作步骤:

1.  从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。

2.  设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。

3.  样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀/释/液40μL;空白孔不加。

4.  除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。

1.  每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

2.  每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。

结果判断:

绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。微信图片_20230418100957.png

试剂盒性能:

1.  准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。

2.  灵敏度:低检测浓度小于1.0ng/L。

3.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

4.  重复性:板内、板间变异系数均小于15%。

5.  贮藏:2-8℃,避光防潮保存。

6.  有效期:6个月。

免责声明:

1.  试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。

2.  严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

 

 

 

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