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ELISA试剂盒样本内源性干扰因素介绍-睿创生物

2024-06-03 [72]

内源性干扰因素,包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等。

 


一、类风湿因子在类风湿患者及正常人血清中,常含有较高或不同浓度的类风湿因子(RF),其一般为IgM型,亦有IgG和IgA型,具有与变性IgG产生非特异结合的特点,因为在ELISA测定中,其可与固相上包被的特异抗体IgG以及随后加入的酶标的特异抗体IgG结合,从而出现假阳性结果。


避免其发生的方法有:


1.  用F(ab)2替代完整的IgG。


2.  标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理。


3.  检测抗原时,可用2-巯基yi醇加入到标本稀释液中使RF降解。 


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二、补体在固相酶免疫测定中,来自哺乳动物的固相抗体和酶标二抗均有激活人补体系统的功能。一方面,固相抗体和酶标二抗可因其吸附及结合过程中抗体分子发生变构,使Fc段的补体C1q结合点暴露出来,使C1q成为一个中介物将二者交联起来出现假阳性结果。另一方面,固相抗体也会因为活化补体的结合,封闭抗体和抗原的表位结合能力而引起假阴性。


解决的办法是:


1.  用EDTA稀释标本。


2.  56℃ 30 min加热血清使C1q灭活。


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