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睿创生物为您讲解人细胞ELISA试剂盒的基质效应

2024-05-09 [443]

 在人细胞ELISA试剂盒实验中,我们或多或少会遇到样本浓度接近试剂盒灵敏度,样本OD450值低于空白值的现象,尤其是血清和血浆样本,这可能是基质效应的结果。那么什么是基质效应呢?

  

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  基质是指除目标分析物之外的样品部分。因为基质成分会显著干扰分析过程,影响分析结果的准确性。这些效应在业内统称为矩阵效应。这是人细胞ELISA试剂盒研发和使用中需要避免的雷。

    当单个样品或少量样品的数值低于空白值时,可能是实验操作中出现了问题。这时候就要增加重复,提高操作技术。当许多样品低于空白值时,应考虑基体效应的影响,建立校正曲线进行修正。基质效应的原因很复杂,有可能是样品中的基质导致原抗ti的结合能力下降,导致样品值低于空白值的现象。因此,无法计算样本值,该值可能为负值。
虽然原因复杂,但有方法可以用来评估基质效应。

(1)线性稀释。一般来说,抗原与捕获抗ti和检测抗ti的结合作用是很强的。样品浓度的稀释不影响它们的结合,但引起基质效应的非特异性结合力要弱得多。如果样品被连续稀释,非特异性结合将导致干燥。干扰会逐渐减少,测量值会更接近真实值。当没有基体效应时,无论如何稀释,测得的值都与真实值一致。但当存在基质效应时,稀释会引起非特异性结合率的降低,测得的值会相应发生较大变化。

(2)掺入回收率实验,在该实验中,将低、中、高浓度的分析物掺入到已测量浓度的样品中。掺入前后测得的浓度增加与掺入浓度的比率是回收率,回收率以百分比表示。回收率在80%-120%之间才能达标。


那么我们如何避免人细胞ELISA试剂盒中的基质效应呢?


    通过优化产品开发阶段,可以尽可能消除基质效应。在ELISA试剂盒的研制过程中,不使用人或动物的血清和血浆作为标准曲线的稀释剂,只能使用fang品。我们定制的缓冲系统,这些优化的缓冲系统可以很好地消除基质效应。在检测一种分析物时,如果其他相关因素或类似的结构因素有非特异性结合,也会导致基质效应。所以我们做了很多交叉反应,保证没有明显的交叉反应和干扰。而且我们的试剂盒必须通过严格的基质效应测试,包括线性稀释和掺入回收率测试,并在说明书中记录测试结果。


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