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小鼠ELISA试剂盒标本的采取与保存

2023-11-28 [196]


大部分小鼠ELISA试剂盒检测均以血清为标本。

1.血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP 为标记的小鼠ELISA试剂盒测定中,如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会产生假阳性反应。


2.一般说来,在5 天内测定的血清标本可放置于4℃,标本在冰箱中保存时间过长导致血清IgG 聚合,使间接法的试剂本底加深。


3.超过一周测定的需-20℃保存。冻结血清融解后,蛋白质局部浓缩,分布不均,应充分混匀并避免产生气泡。


4.混浊或有沉淀的血清标本应先离心或过滤,澄清后再检测。


5.反复冻融会使抗体效价跌落,所以测抗体的血清标本如需保存作多次检测,宜少量分装冰存。


6.保存血清自采集时就应注意无菌操作,也可加入适当防腐剂。


7.抗凝不完-全的标本因纤维蛋白原的干扰而造成假阳性,建议尽量不用抗凝血尤其是肝素抗凝剂。


8.加样时应将所加物加在小鼠ELISA试剂盒板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出。


9.在建立小鼠ELISA试剂盒方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原抗体反应一般在37℃经1-2 小时,产物的生成可达顶-峰。


10.为避免蒸发,板上应加盖,小鼠ELISA试剂盒也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,反应板不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。


11.应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。


12.由于公司的ELISA试剂盒温育是在空气浴中完成,采用水浴会造成值偏高或花板。


13.另外温育中还有边缘效应,边上的值会偏高,建议为了客观的判断结果,将质控放在非边缘位置。

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