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睿创生物的常用方法及原理免费代测

2023-04-11 [364]

主营产品:

天津睿创生物Elisa试剂盒系列

ELISA试剂盒在国内有许多种叫法,例如:ELISA检测试剂盒ELISA Kit酶联免疫试剂盒酶联免疫吸附测定试剂酶联免疫分析试剂盒酶免试剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒酶联免疫吸附测定试剂盒等。

ELISA试剂盒自从60-70年代问世以来,得到科研工作者的认可及推崇,在欧美及中国获得很大的推广,尤其是国内生化领域的长足发展。

Elisa生物试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。

可检测种属

(人,小鼠,大鼠,植物,鱼,虾,蟹,牛,羊,狗,猫,微生物,细胞,土壤等动植物)

可以检测样为

(血清,血浆,唾液,尿液,组织,细胞上清,裂解液等)

产品检测目的:

样本水平表达(定量检测,定性检测,酶活性检测)

规格:96T 可以检测89个样  48T可以检测41个样

备注:6个标准一个空白对照

有效期:6个月 保存2-8°C

elisa试剂盒的优点:

一、高效、灵敏、特异的抗体;

二、稳定的重复性和可靠性;

三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;

四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;

五、最大限度的节省实验经费。

常用方法及原理如下:

1. 夹心法:

夹心法常用于检测大分子抗原,一般的操作步骤为:

a. 将具有专一性的抗体固著(coating)于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体

b. 加入待测检体,检体中若含有待测的抗原,则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结

c. 洗去多余待测检体,加入另一种对抗原专一的一次抗体,与待测抗原进行键结

d. 洗去多余未键结一次抗体,加入带有酶的二次抗体,与一次抗体键结

e. 洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或仪器读取呈色结果

原理:针对抗原分子上2个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物。

2. 间接法

间接法常用于检测抗体,一般的操作步骤为:

a. 将已知的抗原固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余的抗原。

b. 加入待测检体,检体中若含有待测的一次抗体,则其会与塑胶孔盘上的抗原进行专一性键结。

c. 洗去多余待测检体,加入带有酶的二次抗体,与待测的一次抗体键结。

d. 洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酶呈色,藉仪器(ELISA reader)测定塑胶盘中的吸光值(OD值),以评估有色终产物的含量即可测量待测抗体的含量。

原理:利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体。

3. 竞争法

竞争法是一种较少用到的ELISA检测机制,一般用于检测小分子抗原,天津睿创生物其操作步骤为:

a. 将具有专一性的抗体固著于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体

b. 加入待测检体,使检体中的待测抗原与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结

c. 加入带有酶的抗原,此抗原也可与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结,由于塑胶孔盘上固著的抗体数量有限,因此当检体中抗原的量越多,则带有酶的抗原可键结的固著抗体就越少,亦即,两种抗原皆竞相与塑胶孔盘上抗体键结,即所谓竞争法之由来。

d. 洗去检体与带有酶的抗原,加入酶底物使酶呈色,当检体中抗原量越多,代表塑胶孔盘内留下之带有酶的抗原越少,显色也就越浅。

e. 当需要侦测无法获得两种以上单一性抗体的抗原,或是不易得到足够的纯化抗体以固著于孔盘上时,一般会考虑使用竞争法ELISA

原理:将特异性抗体包被于固相载体表面,经洗涤后分成两组:一组加酶标记抗原和被测抗原的混合液,另一组只加酶标记抗原,经孵育洗涤后加底物显色,这两组底物降解量之差,即为所要测定的未知抗原的量。

天津睿创生物免费代测服务

天津睿创生物"始终以"提供好的质量给客户,为客户的利益服务"为理念。拓展顶尖的产品研发与经验丰富的技术团队,致力于创新产品的研发。目前,实验室占地约800平米,内设先进实验仪器设备,能够完成ELISA检测、PCR扩增、免疫学检测等各类生物学实验。天津睿创生物经过10年ELISA试剂盒技术的积累与沉淀,不断创新突破,努力将中国生命科学研究提升到全新的高度!

凡购买本公司目录任何一种酶联免疫检测试剂盒,您只需将需要检测的动物(Human, Rat, Mouse, Rabbit, Monkey, Pig……)种类和检测指标(白介素类、激素类)及标本数量(48T/96T)通知公司业务员即可。

免费代测服务样本要求:
在收集标本前都必须有一个完整的计划,必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测,对收集后当天就进行检测的标本,及时储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,请造模取材后,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差,蛋白极易降解,直接影响实验质量,所以避免反复冻融。代测放免标本的客户取材前须向我司销售人员索要说明书,具体操作注意事项请与我司技术人员沟通。

免费代测服务液体类标本:标本必须为液体,不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。

血 清: 室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。

血 浆: 应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入10%(v/v)抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1%heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心

尿液、胸腹水、脑脊液:用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。

细胞培养上清: 检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.0-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

组织标本: 切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,缓冲液中可加入1μg/L蛋白酶抑制剂或50U/ml的Aprotinin。用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清置于-20度或-70度保存,如有必要,可以将样品浓缩干燥。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

天津睿创生物标本时需注明以下情况:
1、标本编号
2、所测项目
3、是否做复孔
4、实验后标本是否寄回




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